Патент №2057807 - Способ получения карбоксилэстеразы, матрица для обнаружения фосфорорганических соединений и биохимический способ количественного определения фосфорорганических соединений

Использование: биохимия и аналитическая химия и касается получения и применения карбоксилэстеразы из зерен злаков аналитического реагента, для высокочувствительного определения микроколичеств фосфорорганических соединений (ФОС) в различных объектах окружающей среды с помощью матриц и методик. Сущность изобретения: измельченные зерна злаков экстрагируют водой при рН 7,6, осадок отделяют, после ионообменной хроматографии на ДЭАЭ - сорбенте проводят высаливание фермента сульфатом аммония при степени насыщения 0,7, диализуют и высушивают. Полученную карбоксилэстеразу используют для создания одно- и двухэлементных матриц, включающих подложку с нанесенными компонентами субстрат - индикаторной системы. Матрица является универсальным средством для обнаружения ФОС общей формулы: в различных объектах окружающей среды: в воде, воздухе, экстрактах органическими растворителями. Кроме того, карбоксилэстераза из измельченных зерен злаковых культур использована для количественного определения ФОС, включающего измерение активности фермента, в отсутствии и в присутствии анализируемой пробы, в реакции гидролиза субстратов общей формулы ROC(O)R1 и ROC(S)R1, где R - фенил, нафтил 1 и 2, R1-CH3, C2H5. Методики с использованием карбоксилэстеразы отличаются высокой чувствительностью обнаружения ФОС и высокой устойчивостью к мешающим примесям. Карбоксилэстераза растительного происхождения может с успехом заменить в простейших средствах и методиках анализа ФОС эстеразы животного (БуХЭ, АХЭ, ПХЭ) и микробного происхождения. 3 с. п. ф-лы, 2 табл.

Патент №2057807, изображение 1

Классификация патента

Код Наименование
МПК C12N 9/00Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их; способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов
МПК C12Q 1/00Способы измерения или испытания, использующие ферменты или микроорганизмы; составы для них; способы получения подобных составов