Патент №2292895 - Способ выделения мононуклеарных клеток костного мозга человека

Изобретение относится к медицине и касается способов выделения мононуклеарных клеток костного мозга для их использования в различных способах регенерационной клеточной терапии. Сущность способа: получают аспират костного мозга во время пункции гребня подвздошной кости, наслаивают его на градиент плотности (1,077 г/л), центрифугируют в течение 30 мин при 400 g и температуре 18-22°С. Затем собирают слой мононуклеарных клеток с границы раздела фаз. При этом взятие 100 мл аспирата костного мозга проводят с 20 мл гепаринизированного физиологического раствора с концентрацией гепарина 2500 ЕД/мл. Перед наслаиванием гепаринизированный аспират костного мозга предварительно отстаивают в течение 30 мин при температуре 18-22°С, затем собирают верхние 2/3 клеточной взвеси обедненной эритроцитами, после чего эту пробу разводят в 2 раза гепаринизированным фосфатно-забуференным физиологическим раствором с концентрацией гепарина 10 ЕД/мл. Далее, после наслаивания и центрифугирования, слой клеток, собранный с границы раздела фаз, отмывают гепаринизированным фосфатно-забуференным физиологическим раствором с концентрацией гепарина 10 ЕД/мл трехкратным центрифугированием по 10 мин при 400 g и температуре 18-22°С, после чего доводят клеточность суспензии до нужной концентрации. Применение способа позволяет повысить количество получаемых жизнеспособных клеток.(56) (продолжение): CLASS="b560m"disease. Ard. Bras. Cardiol. 2004, Feb., 82(2), p.185-187, 181-184, Epub. 2004, Mar. 17, реф. Найдено из БД PubMed. [Найдено 15.03.2006]. [он-лайн]. MAJUMDAR M.K. et al. Isolation, characterization and chondrogenic potential of human bone marrow-derived multipotential stromal cells. J. Cell. Physiol. 2000, 185, №1, р.98-106, реф. Найдено из БД VINITI.RU. [Найдено 15.03.2006]. [он-лайн]. JP 11009270 19.01.2999.