Патент №2381273 - Способ получения гетерогенного биокатализатора, биокатализатор на основе гидролазы эфиров альфа-аминокислот и способ синтеза аминобета-лактамного антибиотика под действием этого биокатализатора

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения гетерогенного биокатализатора для ферментативного синтеза аминобета-лактамного антибиотика на основе внутриклеточной гидролазы эфиров альфа-аминокислот из бактерий рода Xanthomonas, включающий разрушение биомассы клеток Xanthomonas rubrilineans, экстракцию из нее фермента в водную фазу и последующую его иммобилизацию. Причем разрушение клеток осуществляют поэтапно, сначала нарушая их целостность криогенным воздействием, а затем обрабатывая водную суспензию размороженных клеток бутилацетатом. Экстракцию фермента в водную фазу проводят при нагревании обработанной клеточной суспензии сначала в условиях спонтанно устанавливающегося градиента рН, а затем при постоянном значении рН. Получаемый бесклеточный экстракт используют для процедуры иммобилизации фермента путем его осаждения полиэтиленгликолем в виде ферментных агрегатов и их последующей поперечной сшивки в присутствии глутарового альдегида. Полученный таким образом гетерогенный биокатализатор содержит до 0,95 г белка/г сухого биокатализатора и обладает синтетазной активностью до 2200 МЕ/г сухого биокатализатора. Изобретение позволяет повысить эффективность процедуры получения биокатализатора, повысить активность и стабильность получаемого биокатализатора. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.