Патент №2491348 - Способ определения минимальной подавляющей концентрации антибактериального препарата

Выделяют микроорганизм-возбудитель из биологического материала больного. Готовят стандартную суспензию выделенного микроорганизма-возбудителя и двукратные разведения антибактериальных препаратов с известной активностью. Проводят инокуляцию. Стандартную суспензию выделенного возбудителя объемом 0,1 мл смешивают с 5,0 мл специфичной для данного возбудителя жидкой питательной среды. Инкубируют 24 ч при +37°C. Готовят опытное 1:100 и контрольное 1:200 разведения в той же питательной среде. Каждое из двукратных разведений антибактериальных препаратов в объеме 0,075 мл с равным объемом опытного разведения вносят в опытные лунки планшета. В контрольную лунку вносят 0,150 мл контрольного разведения и инкубируют 48 ч при +37°C. Жидкую фракцию суспензии удаляют из лунок. Для окрашивания в каждую лунку добавляют по 0,2 мл 1% раствора кристалл-виолета. Выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин. Содержимое лунок трижды промывают дистиллированной водой и добавляют в каждую лунку по 0,2 мл 99% раствора димексида. Выдерживают при комнатной температуре 15 мин. Измеряют оптическую плотность среды в контрольной (ОПк) и опытных лунках в оптических единицах (о.е.) на микропланшетном ридере при длине волны 540 нм. При выполнении условия ОПк>0,2 о.е. наибольшее двукратное разведение антибактериального препарата в опытной лунке с оптической плотностью менее 0,2 о.е. определяют как минимальную подавляющую концентрацию (МПК). Изобретение позволяет повысить достоверность определения МПК на 16,7%. 2 пр.