Патент №2124209 - Способ опредения активности комплемента и гель, предназначенный для использования в способе

Способ и гель могут быть использованы в области медицины, а именно в иммунологии для определения in vitro активности комплемента по классическому пути активации при различных заболеваниях, которые могут протекать с вовлечением системы комплемента. Способ и гель обеспечивают пролонгированную стабилизацию структурно-функциональных свойств мембран сенсибилизированых эритроцитов, обуславливающих их повышенную устойчивость в отношении неспецифического лизиса и способность к комплементзависимому лизису при отсутствии ингибирующего влияния на комплементзависимый лизис и при гомогенности измеряемой зоны гемолиза. Предварительно осуществляют приготовление геля, в ходе которого во взвесь сенсибилизированных эритроцитов в агарозе дополнительно вводят селективный 2-адреномиметик в концентрации 0,005-0,01 г/л взвеси. Полученную взвесь вносят в емкость из прозрачного материала, формируя гель таким образом, чтобы площадь рабочей поверхности геля составляла не более 16 мм2, а высота геля превышала величину зоны гемолиза в норме не менее чем в 2,5-3 раза. Готовят сыворотку крови обследуемого пациента. Наносят на рабочую поверхность геля в опытной пробе исследуемую сыворотку крови, в контрольной пробе - стандартную сыворотку крови. Выдерживают опытную и контрольную пробы последовательно в течение 18 ч при 4°С, затем в течение 2 ч при 37 °С, определяют активность комплекта по отклонению значений глубины зоны гемолиза в геле в опытной пробе по сравнению с контрольной. При этом при значении указанного показателя в опытной пробе, составляющем менее 80% от значения показателя в контрольной пробе, определяют пониженную активность комплемента, при значении показателя в опыте, составляющем от 80 до 120 % от контроля, определяют нормальную активность комплемента, а при значении показателя в опыте свыше 120% от контроля определяют повышенную активность комплемента. Гель для определения активности комплемента содержит взвесь сенсибилизированных эритроцитов барана в агарозе, а также дополнительно содержит селективный 2-адреностимулятор, например, фенотерол, сальбутамол или тербуталин при следующем соотношении компонентов, г/л: агароза 9,0-11,0, желатин 0,18-0,22, барбиталовый буфер 176-216 мл/л, сенсибилизированные гемолитической сывороткой эритроциты барана 8,8 -10,8 мл/л, вода дистиллированная - до 1 л. 2 с. и 9 з.п.ф-лы, 8 табл.