Патент №2403284 - Способ получения ингибитора коллагеназ с антикоагулянтным действием из гепатопанкреаса камчатского краба

Изобретение может быть использовано в биотехнологии. Проводят гомогенизацию сырья в 0,1 М ацетате аммония, содержащем 0,1-1 мМ ацетата кальция при рН 6,4-7,0. Гомогенат центрифугируют, к супернатанту добавляют сульфат аммония до 60-70%-ного насыщения. Полученный комплекс ферментов отделяют центрифугированием, растворяют в дистиллированной воде с добавлением 0,1-1 мМ ацетата кальция до получения истинного раствора. Затем очищают, концентрируют и обессоливают ферменты на поливолоконной мембране с размером пор 100 кДа. Промывают супернатант, содержащий ингибитор коллагеназы, дистиллированной водой, прогревают до 60-100°С, отделяют осадок центрифугированием. Полученный суммарный препарат ингибитора коллагеназы подвергают дополнительному растворению в 0,1 М ацетата аммония с рН 6,0-6,4, отделяют осадок центрифугированием и добавляют к супернатанту сульфат аммония 35-45% насыщения. Осадок отделяют и растворяют в 0,01 М трисовом буфере с рН 7,0-8,0. Раствор прогревают при 70-90°С, подвергают центрифугированию. Полученную сульфат-пасту растворяют в 0,05 М Трис-буфере с рН 8,0 с добавлением 0,5 М NaCl. Фракционируют гель-фильтрацией на Сефадексе G-100 с последующим концентрированием активных фракций ультрафильтрацией на мембране с размером пор 30-50 кДа. Супернатант, содержащий целевой продукт, промывают и лиофильно высушивают. Изобретение позволяет расширить ассортимент препаратов, обладающих противосвертывающим действием. 2 з.п. ф-лы, 5 ил, 4 табл.

Патент №2403284, изображение 1
Патент №2403284, изображение 2
Патент №2403284, изображение 3

Классификация патента

Код Наименование
МПК C12N 9/00Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их; способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов
МПК C12N 9/64Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их; способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов - получаемые из животной ткани, например реннин

Похожие патенты

Патент 2521655 Способ оценки экспрессии генов триптофанил-трнк-синтетазы как маркера перегрузок в ходе тренировки спортсменов - состояния перетренированности
Патент 2517608 Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот
Патент 2495123 Способ получения модифицированной формы триптофанил-трнк-синтетазы
Патент 2415934 Клетка-хозяин, содержащая вектор для продуцирования белков, требующих гамма-карбоксилирования
Патент 2372401 Эукариотическая клетка-хозяин для экспрессии витамин к-зависимого белка, вектор экспрессии в эукариотических клетках, способ получения гамма-карбоксилированного витамин к-зависимого белка и способ получения фармацевтической композиции для индукции свертывания крови или стимулирования повышения или понижения коагуляции
Патент 2364626 Способ получения, способ очистки и способ стабилизации полипептидов фактора vii, ix и x