Патент №2077585 - Рекомбинантная плазмидная днк рдти 23, способ получения рекомбинантной плазмидной днк рдти 23 и штамм бактерий escherichia coli, содержащий рекомбинантную плазмидную днк рдти 23 - продуцент слитого белка дтил 2

Использование: биотехнология, медико-биологические исследования Т-клеток. Сущность: получение рекомбинантной плазмидной ДНК рДИ23, определяющий синтез слитого белка дифтерийный токсин-интерлейкин 2 (ДТИЛ2) и штамма бактерий Escherichia coli, содержащего указанную плазмидную ДНК. Рекомбинантная плазмидная ДНК рДТИ23 имеет размер 4,7 т.п.о., ген ДТИЛ2 находится в ней под контролем индуцибельного промотора лактозного оперона из плазмиды рVС18, что позволяет увеличить уровень экспрессии белка в десятки раз. Для получения плазмиды рДТИ23 соединяют рамки считывания гена дифтерийного токсина (ДТ) из коринефага и природного гена зрелого интерлейкина 2 человека при использовании Eco RI-сайта гена ДТ, встраивания Bam HI-линкера, обработки эндонуклеазой рестрикции Bam HI и последующего лигирования фрагмента ДНК в векторной плазмиде. Штамм Е. соli хорошо растет на простых питательных средах, проявляет устойчивость к ампициллину и продуцирует слитый белок ДТИЛ2 после индукции изопропил-b-D-тиогалактозидом. 3 с.п. ф-лы, 5 ил.