Патент №2112531 - Способ получения стимулятора иммунитета при различных заболеваниях

Способ предназначен для получения иммуностимулятора из культуральной жидкости штампа-продуцента Vibrio cholerae. Способ включает культивирование продуцента на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, с подпиткой глюкозой, аэрацией и перемешиванием в процессе культивирования. В конце логарифмической фазы роста продуцента обезвреживают вибрионы с последующим выделением токсина из супернатанта культуральной жидкости. В процессе культивирования продуцента поддерживают температуру в первые 2-3 ч 36-37oC, в последние 5-6 ч - 34,25-35,75oC, рН соответственно 7,3 - 7,9 и 7,8 - 8,2. Осуществляют в расчете на 1 л питательной среды подпитку глюкозой в первые 4-5 ч 5-7 мл/мин, следующие 2 ч - 7,5-12,5 мл/мин, последние 1-2 ч - 15-20 мл/мин, дополнительную подпитку питательной среды аммиаком в первые 2-4 ч - 3 мл/мин. При культивировании осуществляют аэрацию первые 3 ч - 400 мл/мин, следующие 3-4 ч 500 мл/мин, последние 1-2 ч - 500-600 мл/мин. Для превращения токсина в анатоксин к культуральной жидкости добавляют формалин до конечной его концентрации 0,6 об.%. Супернатант культуральной жидкости отделяют и выдерживают при температуре 10-12oC в течение 25-34 сут при рН 6,7-7,3 и постоянной концентрации формалина не менее 0,2 об. %. После выдерживания двукратно осаждают анатоксин при насыщении супернатанта сульфатом аммония соответственно до 38 и 80 об.%, полученный осадок отделяют, ресуспендируют и очищают с помощью диализа. Способ позволяет получить экологически безвредный, нетоксичный, высокоактивный иммуностимулятор, позволяет повысить выход целевого продукта и упростить процесс получения. 1 табл.