Патент №2232807 - Рекомбинантная плазмидная днк ptrcte-oph и продуцент фермента органофосфатгидролазы

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии. Оно представляет собой сконструированную in vitro рекомбинантную плазмидную ДНК, содержащую ДНК процессированной формы фермента органофосфатгидролазы (ОРН), trc-промотор Escherichia coli и синтетический участок - усилитель трансляции, обуславливающие биосинтез фермента ОРН, а также штамм Escherichia coli - продуцент этого белка. Рекомбинантный фермент может быть использован для производства препаратов на основе ОРН, предназначенных для деградации фосфорорганических соединений, а также для их аналитического определения. Изобретение решает задачу создания генно-инженерной конструкции и штамма клеток, которые обеспечивают получение значительных количеств активной растворимой формы органофосфатгидролазы в цитоплазме клеток путем индуцибельного синтеза фермента. Поставленная задача решается путем конструирования рекомбинантной плазмидной ДНК pTrcTE-OPH, кодирующей индуцибельный синтез ОРН и штамма Escherichia coli DH5/pTrcTE-OPH, обеспечивающего синтез этого белка с уровнем экспрессии, позволяющим получать до 12 мг очищенного белка из 1 г влажной биомассы. Индуцибельный высокий уровень синтеза целевого полипептида обеспечивается тем, что предлагаемая плазмида pTrcTE-OPH отличается от известной наличием trc-промотора Е.coli и синтетического усилителя трансляции гена 10 бактериофага Т7. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 4 ил.