Патент №2296159 - Штамм культивируемых клеток мышиной гибридомы а3, используемый для получения моноклональных антител к антигену ядрышек клеток человека

Изобретение относится к биотехнологии, биологии и медицине и может быть использовано для изучения структурно-функциональной организации ядрышка и механизмов действия фармакологических препаратов на клетки человека. Штамм мышиных гибридомных клеток, названный A3, получают путем слияния спленоцитов мыши, иммунизированных грубой фракцией ядер клеток человека линии RAMOS, с клетками мышиной миеломы линии P3-X63-Ag8.653. Полученная гибридома секретирует моноклональные антитела (МонАТ) к антигену, названному A3-антиген, локализованному в ядрышках клеток человека вне зависимости от их тканевого или линейного происхождения. При различных способах фиксации клеток A3-антиген выявляется в составе дискретных (как правило, несколько десятков) фокусов, расположенных исключительно в зоне ядрышек. Уникальным свойством A3-антигена является его высокая чувствительность к действию различных ингибиторов белкового синтеза, например эметину, анизомицину, циклогексимиду и пуромицину. При инкубации клеток в присутствии перечисленных веществ A3-антиген мигрирует из ядрышек в многочисленные фокусы, расположенные в нуклеоплазме ядра. Эта миграция A3-антигена предшествует гибели клеток путем апоптоза. МонАТ A3, производимые штаммом A3, рекомендуются для выявления ядрышек и оценки общего уровня синтеза белка в клетках человека методами клеточной биологии. Антитела могут быть использованы для выявления возможной контаминации культур клеток человека клетками другой видовой принадлежности, а также для изучения биологической активности известных и новых ингибиторов белкового синтеза, включая фармакологические препараты, в клетках человека in vitro. 1 з.п. ф-лы, 6 ил.