Патент №2308286 - Способ получения альфа-фетопротеина

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения альфа-фетопротеина (АФП). Сущность метода заключается в следующем: препарат получают путем выделения из сыворотки крови и очистки с помощью двойной аффинной хроматографии, причем между хроматографическими очистками проводят фракционирование белков апротинином 0,1-1 г/л и этиловым спиртом 19-40% насыщения по объему при рН 5,7-5,8 и температуре минус 3 - минус 5°С, а инактивацию бактерий и вирусов осуществляют перед первой очисткой на иммуносорбенте в присутствии растворов хлороформа и Тритона Х-100. Нанесение на аффинный сорбент сыворотки крови проводят с предварительной блокадой активных центров неспецифической сорбции сывороткой крупного рогатого скота, а нанесение на иммуноаффинный сорбент с антителами против альфа-фетопротеина производят при рН 8,0-9,0 и при температуре 18-20°С. Примесные белки сыворотки крови удаляют неспецифической элюцией 1 и 2 М раствором магния хлорида, а аффинно-связанный АФП элюируют с помощью 4 М раствора магния хлорида и буферного раствора Gly-HCl с рН 2,0-3,0, при этом в качестве второго аффинного сорбента используют сефарозу с антителами против IgG человека. 1 табл., 1 ил. (56) (продолжение): CLASS="b560m"the human hepatoma cell line Hep G2 in a serum-free medium.", Anal Biochem. 1988; 169(2):306-11.