Патент №2459872 - Способ повышения специфичности обратной транскрипции
Изобретение относится к области молекулярной биологии и биохимии и может быть использовано в молекулярной диагностике, связанной с выявлением РНК-мишеней. Предложен способ повышения специфичности обратной транскрипции, включающий приготовление образца, предположительно содержащего хотя бы один вид подлежащей обратной транскрипции РНК (мишени) и хотя бы один вид РНК, отличной от мишени; обработку его полинуклеотидфосфорилазой Thermus thermophilus (Tth ПНФазой) при температуре 60-75°С и микромолярной концентрации магния, проводимую после отжига исследуемого образца с защитным олигонуклеотидом, располагающимся по 3'-сторону от участка, подлежащего обратной транскрипции, и образующим с мишенью гибрид, стабильный в условиях инкубации; и реакцию обратной транскрипции, которую проводят с полученной на стадии предварительной обработки реакционной смесью без ее дополнительной очистки. 4 з.п. ф-лы, 7 ил., 11 пр.
Классификация патента
Код | Наименование |
---|---|
МПК C12N 9/10 | Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их; способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов - трансферазы (2.)рибонуклеазы 9/22 |
МПК C12P 19/34 | Получение соединений, содержащих сахаридные радикалы - полинуклеотиды, например нуклеиновые кислоты, олигорибонуклеотиды |
МПК C12Q 1/68 | Способы измерения или испытания, использующие ферменты или микроорганизмы; составы для них; способы получения подобных составов - использующие нуклеиновые кислоты |