Патент №2488635 - Способ получения рекомбинантного антиангиогенного полипептида

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантного плазминогена человека, и может быть использовано в медицине для создания новых лекарственных препаратов с антиангиогенным терапевтическим эффектом. Способ заключается в экспрессии гена фрагмента плазминогена человека с 453 по 543 аминокислоту в составе клеток E.coli с последующим выделением и очисткой конечного продукта из периплазмы клеток. Экспрессию осуществляют в клетках E.coli BL21 (DE3), трансформированных рекомбинантными плазмидными ДНК pEK5 или pEK5H с физическими картами, представленными на фиг.2, содержащими ген целевого полипептида, слитый с геном сигнального пептида OmpA, ориджин репликации pUC ori, ген устойчивости к канамицину и ген, кодирующий lac-репрессор под контролем T7-промотора. При этом рекомбинантная плазмидная ДНК рЕК5Н дополнительно содержит между генами OmpA и целевого полипептида участки, кодирующие аминокислотные последовательности НННННН и DDDDK. Изобретение обеспечивает секрецию целевого полипептида в периплазму клетки с высоким выходом. 3 з.п. ф-лы, 5 ил., 6 пр.