Патент №2054037 - Рекомбинатная плазмидная днк peco29ki, определяющая синтез эндонуклеазы рестрикции eco29ki и штамм escherichia coli - продуцент эндонуклеазы рестрикции eco29ki

Использование: полученные плазмида и штамм могут быть использованы для получения эндонуклеазы рестрикции Eco 29KI, узнающей и расщепляющей последовательность нуклеотидов 5-CCGCGG-3, которая может найти применение в генно - инженерных исследованиях. Рестриктаза Eco 29 KI является изошизомером рестриктазы Sac II. Сущность изобретения: полученная новая рекомбинантная плазмида PECO 29 KI размером 6,6 т. п. н. содержит гены системы рестрикции - модификации Eco 29 KI, состоит из Cla I - фрагмента ДНК вектора PUC 129 и двух Cla I - фрагментов природной плазмиды p 29к, содержит четыре участка узнавания рестриктазой Hind III три участка узнавания рестриктазой, два участка - Xho I, по одному участку для рестриктаз: Sal I, Bgl II, Bam H I, детерминанту резистентности к ампициллину. Полученная плазмида обеспечивает повышенный синтез рестриктазы Eco 29 KI. Предлагаемый штамм Escherichia coli BKM CR - 369 D полученный трансформацией плазмидной ДНК pEco 29 KI в штамм E. coli Z 85 обеспечивает высокий уровень содержания фермента, не менее 100 млм ед. на 1 г сырой биомассы. Выход очищенного фермента составляет 500000 ед/г биомассы. 2 с. п. ф-лы